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c18固相萃取小柱的萃取過程和操作步驟
更新時間:2020-07-27 點擊次數(shù):9630
c18固相萃取小柱是一個包括液相和固相物理萃取過程。在固相萃取過程中,固相對分析物的吸附力大于樣品基液。當樣品通過SPE柱時,分析物被吸附在固體填料表面,其它樣品組分基液通過柱子。用適當溶劑將樣品洗脫下來,從而起到對樣品的分離、純化或濃縮作用。
操作步驟:
1)柱預處理(活化):預處理由兩個目的“一是去除填料中可能存在的雜質,二是對填料溶劑化,展開碳氫鏈增加和分析物作用的表面積。填料溶劑化,提高結果的重現(xiàn)性對于反相填料來說,預平衡是必須的,即先用強溶劑潤濕固定相,然后用弱溶劑加以平衡。
2)上樣:把處理好的樣品上柱,用正壓或負壓使樣品通過柱子。樣品的流速必需控制,對于生物樣品,一般在1.5ml/min。對于以離子交換為作用機理的萃取,樣品通過SPE柱的速度應該適當?shù)慕档?,以保證分析物有足夠的時間與SPE柱填料的離子交換功能團發(fā)生作用。
3)淋洗:選擇合適溶劑,去除干擾雜質,使目標分析物得以保留。
4)洗脫:選擇合適強度的溶劑洗脫目標分析物。
c18固相萃取小柱適用于可解離成帶電離子的化合物,其機理是利用帶電荷的目標化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質可以是極性的,如水溶液,也可以是非極性的有機溶液,但在實際應用中以水溶液較多,包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。