一種更高效的層析方法--MMC
更新時(shí)間:2021-12-23 點(diǎn)擊次數(shù):2978
混合模式層析(mixed-mode chromatography,MMC)對(duì)功能配基的結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),組合兩種或以上的相互作用模式,加強(qiáng)對(duì)目標(biāo)蛋白的親和性和選擇性,從而提高純化效率。與傳統(tǒng)的IEC和HIC相比,新型層析模式MMC具有高載量、高選擇性和高效率等優(yōu)勢(shì)。
MMC配基與目標(biāo)蛋白之間存在多種相互作用模式,包括疏水作用、靜電作用以及氫鍵作用等。
MMC介質(zhì)的配基密度較高,且具有非鹽依賴吸附特性,并可通過(guò)調(diào)節(jié)pH來(lái)實(shí)現(xiàn)蛋白的有效洗脫。
蛋白可與MMC介質(zhì)所偶聯(lián)的疏水基團(tuán)和離子交換基團(tuán)共同作用:當(dāng)離子強(qiáng)度較低時(shí),靜電相互作用起主導(dǎo)作用;當(dāng)離子強(qiáng)度較高時(shí),則疏水相互作用占據(jù)主導(dǎo)作用;中等離子強(qiáng)度時(shí),疏水和靜電可能共同作用。
蛋白的洗脫通常有兩個(gè)途徑:當(dāng)以疏水結(jié)合為主導(dǎo)時(shí)可以通過(guò)降低洗脫液pH,通過(guò)蛋白和配基之間的靜電排斥作用來(lái)實(shí)現(xiàn)洗脫;當(dāng)靜電結(jié)合為主導(dǎo)時(shí),則可通過(guò)增加離子強(qiáng)度從而減弱靜電相互作用,實(shí)現(xiàn)蛋白的洗脫。
月旭科技現(xiàn)有兩種復(fù)合型配基,MMC與MIX A,以下是產(chǎn)品的技術(shù)參數(shù):
Solid MMC 復(fù)合型弱陽(yáng)離子交換介質(zhì)
層析柱:TXK 50/30;
介質(zhì)類(lèi)型:Solid MMC;
樣品:300M重組蛋白畢赤酵母發(fā)酵液;
平衡緩沖液:0.4M NaCl,20mM PB,pH6.5;
洗脫緩沖液:1.5M NaCl,20mM PB,pH6.5。
層析柱:TXK 50/30;
介質(zhì)類(lèi)型:Solid MiX A;
樣品:300M重組蛋白畢赤酵母發(fā)酵液;
平衡緩沖液:0.1M NaCl,20mM磷酸緩沖液,pH7.0;
洗脫緩沖液:1.5M NaCl,20mM磷酸緩沖液,pH7.0。