相信小伙伴們在日常測試中會發(fā)現(xiàn),評價色譜峰的峰形對稱性,有拖尾因子、對稱因子、不對稱因子三種參數(shù)。而目前使用的分析軟件,ChemStation工作站中的對稱因子,Empower工作站中的USP拖尾因子,Chameleon工作站中并沒有對稱因子參數(shù),是以不對稱度評價的。這三種參數(shù)的關(guān)系是什么,有什么區(qū)別,今天小編就和大家聊一下。
理想條件下,色譜峰應(yīng)該具有高斯型的特征:
式中,χ等于(t-tR)/σ,t是時間,σ=W/4,y是峰高。色譜圖中的真實峰通常會稍稍偏離對稱的高斯峰形,通常會或多或少帶一點拖尾。如下圖所示:
拖尾因子:Tailing factor常用Tf表示,以峰高5%處計算。
不對稱因子:Asymmetry factor常用As表示,以峰高10%處計算。
對稱因子:Symmetry factor常用S表示,與不對稱因子As互為倒數(shù)關(guān)系。
As和Tf值的關(guān)系大概可以表達為:
As≈1+1.5(Tf-1)
所以一般來說As的值在一定程度上大于Tf的值。
峰形隨著不對稱因子(As)和拖尾因子(Tf)而變化。當As或者Tf=1.0時,對應(yīng)的是一個wan美的對稱色譜峰,在這種情況下,兩個色譜峰可以很好地彼此分開。然而,隨著峰拖尾的程度加重,它們之間的分離也變得糟糕。多數(shù)情況下峰拖尾的程度并不是很嚴重(Tf<1.2),并且一般不會被注意到。這種程度的拖尾(Tf<1.2)對分離造成的影響可以忽略不計,除非是在一個很大的色譜峰后跟隨了一個很小的色譜峰的情況下。
拖尾因子、對稱因子和不對稱因子規(guī)定范圍探討
中國藥典(CP)要求拖尾因子的范圍是在0.95-1.05,是有一個適用前提的,即中國藥典規(guī)定峰高法定量時拖尾因子應(yīng)該在0.95-1.05之間,低于0.95為前延峰,高于1.05為拖尾峰。
歐洲藥典(EP)和英國藥典(BP)規(guī)定進行有關(guān)物質(zhì)或含量測定時,除另有規(guī)定外,色譜圖中定量用對照品溶液的色譜峰對稱因子應(yīng)為0.8~1.5。
美國藥典(USP)中出現(xiàn)了對某些化合物拖尾因子要求不大于2.0。
日本藥典(JP)中沒有具體規(guī)定拖尾因子的范圍。
從各國藥典對拖尾因子范圍的約束來看,拖尾因子并沒有一個數(shù)值范圍的確定標準,在實際的色譜實驗中需要具體問題具體分析。