C30色譜柱長度選擇的基本原則:
C30色譜柱越長,柱效越高。
選擇可以滿足分離度要求的zui短的柱子。
如果即使是zui長規(guī)格的C30色譜柱依然無法滿足分離度的要求,請(qǐng)考慮更換固定相或膜厚。
分離度和柱長的平方根成正比,兩倍的柱長只能增加40%的分離度。
標(biāo)準(zhǔn)柱:標(biāo)準(zhǔn)柱長,滿足大部分應(yīng)用。
短柱:通常用于10個(gè)組份以下簡單樣品的快速分析。
長柱:復(fù)雜樣品分析。
恒溫分析:保留時(shí)間由柱長決定,柱長加倍分析時(shí)間也加倍。
程升分析:保留時(shí)間主要取決于柱溫,分離度的提升和恒溫分析類似,但分析時(shí)間只是略有增加。
由于分離度正比于柱長的平方根,所以增加柱長對(duì)分離是有利的。但增加柱長會(huì)使各組分的保留時(shí)間增加,延長分析時(shí)間。因此,在滿足一定分離度的條件下,應(yīng)盡可能使用較短的柱子。
C30色譜柱的保養(yǎng):
C30色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。在對(duì)C30色譜柱使用前進(jìn)行測試以后,要根據(jù)不同的情況對(duì)C30色譜柱進(jìn)行保養(yǎng):
①C30色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。
注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
②長期保存C30色譜柱:C30色譜柱要長時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。
對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲(chǔ)存于水中,并將購買新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲(chǔ)存的溫度是室溫。