凝膠制備液相色譜儀在生化方面的應(yīng)用:
主要方向是分析嘌呤、嘧啶基的核甙或核甙酸及具有相應(yīng)的肽和蛋白質(zhì)。
①在細(xì)胞核中有種類繁多的甙及核甙酸,可用不同的檢測(cè)器或酶轉(zhuǎn)移檢測(cè)器或利用酶反應(yīng)進(jìn)行定性測(cè)定。用離子交換柱和緩沖游泳梯度淋洗。用含磷酸的緩沖水溶液的梯度淋洗法均能得到滿意的結(jié)果。
?、诜治龊怂峤陙碛嘘P(guān)分析核酸的研究很多,主要是分離RNA、DNA及碎片。現(xiàn)在使用硅烷化的硅藻土或長(zhǎng)碳鏈季胺鹽涂漬=在上面制成系列填充柱。已能分離t-RNA,r-RNA及DNV碎片。有沒的緩沖液淋洗,還可利用此技術(shù)做RNA碎片的序列分離制備工具,對(duì)生物研究起了重要的作用。
③氨基酸、肽、蛋白質(zhì)的分析,氨基酸分析主要是制成熒光衍生物或酰氯的衍生物,然后測(cè)定其序列。近來也可用凝膠制備液相色譜儀的柱后衍生物法測(cè)定其序列。操作簡(jiǎn)便、速度快、深受歡迎。用四烷基氯化胺肽形成離子對(duì)測(cè)定蛋白質(zhì),其分離效果也很好。
?、苊傅姆治觯甘窃谘寮捌渌順悠分谐S械姆磻?yīng)產(chǎn)物,化學(xué)分析法操作不便,易造成誤差,用色譜技術(shù)分析,具有操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。如測(cè)定堿性或酸性磷酸酶的含量,測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物中腺甙脫 胺酶的含量等,目前對(duì)酶用色譜法分離分析的研究工作已開展很多。
?、萏堑姆治觯堑姆治鍪瞧渌椒ㄝ^難完成的。如把糖與硼酸緩沖液預(yù)選混合,使生成糖-硼酸絡(luò)合離子,再進(jìn)行分離。可把蔗乳糖、阿蘆糖、果糖、阿拉伯糖、巖藻糖、半乳糖、山梨糖、木糖、葡萄糖等幾十種,全部分開。也可用胺基柱分離各種天然產(chǎn)物中伯糖的各繃分。