快速液相色譜柱的工作原理
當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定保留的時(shí)間不同,從而按一定次序由固定相中流出。
快速液相色譜柱的結(jié)構(gòu)及其主要功能
由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲(封頭)與柱填料等組成。
柱管:多用不銹鋼制成,若果使用時(shí)柱壓不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。
壓帽:即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽,中部有小孔,多為聚四氟乙烯制成,用于固定篩板。
密封環(huán):位于接頭螺旋環(huán)內(nèi)壁的彈性環(huán),多為聚四氟乙烯制成,用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。
如何更好的使用快速液相色譜柱
1.拿到色譜柱后先閱讀說(shuō)明書(shū),了解色譜柱的具體性能:耐受溫度、耐受PH等。以及色譜柱的沖洗和保存條件。經(jīng)過(guò)柱校測(cè)試確認(rèn)色譜柱本身沒(méi)有問(wèn)題后方可正常使用。
2.樣品充分前處理,確保樣品的潔凈;使用保護(hù)柱或在線過(guò)濾器,根據(jù)實(shí)際情況更換保護(hù)柱芯或?yàn)V片。
3.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。
4.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中如果流動(dòng)相中使用了緩沖鹽,避免出現(xiàn)鹽析。
5.選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是PH),以避免固定相被破壞,PH過(guò)低共價(jià)鍵斷裂,鍵和相水解;PH過(guò)高硅膠溶解。
6.使用過(guò)程中,如果壓力升高,或出現(xiàn)污染,選擇適當(dāng)?shù)臈l件沖洗或反沖。