s-x3凝膠色譜屬于液相色譜儀器,它是按被分析混合物不同組分分子大小的不同進(jìn)行分離的,多用于高聚物的分析。它以液體做活動相,以多孔固體做固定相,其中孔是有一定尺寸限制的,而且大小不一。
s-x3凝膠色譜的重要參數(shù)
⑴柱體積:柱體積是指凝膠裝柱后,從柱的底板到凝膠沉積表面的體積。在色譜柱中充滿凝膠的部分稱為凝膠床,因引柱體積又稱“床”體積,常用Vt表示。
⑵外水體積:色譜柱內(nèi)凝膠顆粒間隙,這部分體積稱外水體積,亦稱間隙體積,常用Vo表示
⑶內(nèi)水體積:因?yàn)槟z為三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),顆粒內(nèi)部仍有空間,液體可進(jìn)入顆粒內(nèi)部,這就分間隙的總和為內(nèi)水體積,又稱定相體積,常用Vi表示。
不包括固體支持物的體積(Vg)。
⑷峰洗脫體積:是指被分離物質(zhì)通過凝膠柱所需洗脫液有體積,常用Ve表示。當(dāng)使用樣品的體積很少時,(與洗脫體積比較可以忽略不計(jì)),在洗脫圖中,從加樣到峰頂位置所用洗脫液體積為Ve。當(dāng)樣品體積與洗脫體積比較不能忽略時,洗脫體積計(jì)算可以從樣品體積的一半到峰頂位置。當(dāng)樣品很大時,洗脫體積計(jì)算可以從應(yīng)用樣品開始到洗脫峰升高的彎曲點(diǎn)(或半高處)。
s-x3凝膠色譜的選購
它的分離過程是在裝有多孔固定相的色譜柱中進(jìn)行的。當(dāng)尺寸大小不同的分子通過色譜柱時,可占據(jù)的窨體積也不同。對活動相分子而言,填料孔的尺寸大得多,因些,活動相可以自由擴(kuò)散出進(jìn);而大小不同的樣品分子則要滲透到不同的孔中,較大的分子只能進(jìn)進(jìn)較大的孔中,較小的分子不僅能進(jìn)進(jìn)大孔、中孔,還能進(jìn)進(jìn)較小的孔。
因此,較小分子在柱內(nèi)流經(jīng)的路程和時間比大分子長得多,這樣,當(dāng)不同尺寸的高聚物分子流經(jīng)多孔色譜柱時,大分子先被淋出,而小分子后淋出,因而高聚物分子便按照尺寸大小分開了,用檢測器對其分別進(jìn)行丈量就可以獲得樣品的組分信息。
s-x3凝膠色譜由溶劑貯存器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測記錄系統(tǒng)以及一些附屬電子儀器所組成。其中檢測器又可以分為濃度檢測器和分子量檢測器。