光化學(xué)衍生(PCD)方法綜述
更新時(shí)間:2021-10-13 點(diǎn)擊次數(shù):3061
光化學(xué)衍生(PhotoChemical Derivatization, PCD)分析法是基于光化學(xué)反應(yīng)而建立的一類分析方法,它以其*的衍生方式與傳統(tǒng)的熒光,化學(xué)發(fā)光,紫外-可見,電化學(xué)等檢測(cè)方法相結(jié)合,提高了原有方法的靈敏度與選擇性,極大地拓展了傳統(tǒng)檢測(cè)方法的應(yīng)用范圍,在藥物、復(fù)雜生物樣品,環(huán)境樣品分析測(cè)定等方面得到廣泛應(yīng)用。
光化學(xué)衍生器的使用十分簡(jiǎn)單,將光化學(xué)衍生器的兩端管路分別連接到色譜柱的出口端和熒光檢測(cè)器的入口端,然后打開儀器開關(guān)等待紫外燈穩(wěn)定即可使用。
1. 黃曲霉毒素G1和B1衍生
自然界中的霉菌分布廣泛,種類繁多,據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織估計(jì),目前世界上至少有25%左右的谷物被霉菌毒素污染,其中最為嚴(yán)重的是黃曲霉毒素的污染,它們是一類具有相似結(jié)構(gòu)的二氫呋喃雜氧萘的衍生物,有B1, B2, G1, G2, M1等,其中B1毒性*,是qin化鉀的10倍,pi霜的68倍,但用熒光檢測(cè)器檢測(cè)時(shí),B1和G1的響應(yīng)很低,需要進(jìn)行衍生增強(qiáng)才能檢測(cè)到。
月旭科技WelView光化學(xué)衍生器經(jīng)過優(yōu)化的衍生管路能夠顯著提升樣品衍生效果,使用黃曲毒霉素混標(biāo)進(jìn)行測(cè)試發(fā)現(xiàn)相同的色譜條件下衍生后G1和B1的峰面積是未衍生時(shí)的8倍和6倍以上。
黃曲毒霉素混標(biāo)未衍生譜圖
(來(lái)源:月旭色譜數(shù)據(jù)庫(kù))
黃曲毒霉素混標(biāo)衍生后譜圖
(來(lái)源:月旭色譜數(shù)據(jù)庫(kù))
2. 磺胺類藥物衍生
磺胺類藥物(Sulfonamides)是一類人工合成的抗菌藥,具有效價(jià)高、抗菌譜廣,毒性小,使用方便等特點(diǎn),而廣泛使用于畜牧業(yè)生產(chǎn)。但其不合理的使用會(huì)通過肉類食品在人體蓄積,造成危害。由于質(zhì)譜檢測(cè)成本高,紫外檢測(cè)靈敏度低,選擇性差,應(yīng)用有局限性。推薦采用光化學(xué)衍生方法對(duì)樣品進(jìn)行衍生后進(jìn)行熒光檢測(cè)分析,能夠獲得較好的檢測(cè)效果。
如下例中,對(duì)于SDZ, SPD, SMR, SM2, SMD, SQX等六種磺胺類藥物衍生前后的對(duì)比圖。
六種磺胺類藥物衍生后譜圖
(來(lái)源:月旭色譜數(shù)據(jù)庫(kù))
3. 硫肟醚類農(nóng)藥衍生
硫肟醚是國(guó)家南方農(nóng)藥創(chuàng)制中心湖南基地研制成功的2種新型殺蟲劑,對(duì)多種害蟲具有優(yōu)良的防治效果,硫肟醚類農(nóng)藥測(cè)定方法主要有光化學(xué)熒光法和質(zhì)譜法,質(zhì)譜法成本較高,難以推廣。通過光化學(xué)衍生法可實(shí)現(xiàn)衍生產(chǎn)物的高靈敏度檢測(cè)。
虛線:未開衍生器的譜圖,
1和2兩種硫肟醚沒有熒光發(fā)射。
實(shí)線:打開衍生器后,
1和2兩種硫肟醚均有較強(qiáng)的熒光。
(來(lái)源:DOI 10.3321/j.issn:0253-3820.2007.06.028)
4. 強(qiáng)化食品中葉酸含量測(cè)定時(shí)衍生增強(qiáng)
葉酸是一種重要的B族維生素,是機(jī)體細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的必需物質(zhì),是維持生物體正常生命過程所必需的一類有機(jī)物質(zhì),與新生兒缺陷,心血管疾病,精神疾病,胃腸功能異常,免疫缺陷及腫瘤等具有相關(guān)性。
葉酸的檢測(cè)方法比較多,HPLC可實(shí)現(xiàn)葉酸的*分離,特異性高,但葉酸一般含量低,熒光很弱,痕量分析時(shí),推薦采用光化學(xué)衍生方法,葉酸在254nm紫外光照射后光化學(xué)產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度能得到較大增強(qiáng),用于片劑或維生素制劑中痕量葉酸的測(cè)定。方法具有操作簡(jiǎn)便,無(wú)需要外加試劑,重現(xiàn)性好,選擇性好,靈敏度高的特點(diǎn)。
(來(lái)源:DOI 10.13590/j.cjfh.2014.04.011)
如上圖,對(duì)于奶粉等樣品進(jìn)行分析,流動(dòng)相為50mmol/L lin酸二氫鉀水溶液(pH=5.0)和乙腈,采用梯度洗脫,改善峰形,與雜質(zhì)有效分開。
5. 辣椒油中4種su丹紅染料的的分析
su丹紅是一類人工合成的以苯基偶氮萘酚為主要基團(tuán)的偶氮染料,其外觀為暗紅色或深黃色片狀體,是親脂性化合物,具有潛在致癌性,我國(guó)和歐盟都禁止添加在食品中。
su丹紅檢測(cè)方法較多,但都有選擇性差或檢測(cè)成本高等問題,大批量樣品的快速測(cè)定,推薦采用HPLC+PCD+FLD的方法,達(dá)到選擇性好、靈敏度高和價(jià)格友好的檢測(cè)。這種方法對(duì)于su丹紅Ⅲ和su丹紅B的檢測(cè)限比PDA檢測(cè)方法低一個(gè)數(shù)量級(jí)。
虛線:未開衍生器的譜圖,4種su丹紅沒有熒光發(fā)射。
實(shí)線:打開衍生器后,4種su丹紅均有較強(qiáng)的熒光。
(來(lái)源:DOI 10.3724/SP.J.1123.2012.01015)
除此之外,光化學(xué)衍生方法在核黃素檢測(cè)、多種維生素檢測(cè)、多種霉菌/真菌,以及離子色譜分析領(lǐng)域有多種應(yīng)用。
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紫外燈累計(jì)使用 時(shí)間計(jì)時(shí) | 紫外燈使用實(shí)時(shí)計(jì)時(shí), 彩色屏顯示 |
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