絲氨酸蛋白酶純化方案

更新時(shí)間：2021-10-13 點(diǎn)擊次數(shù)：1681

絲氨酸蛋白酶是一種種類豐富的酶類，之所以以此命名是因?yàn)樵诿傅拇呋钚晕稽c(diǎn)上包含絲氨酸在內(nèi)的絲氨酸、組氨酸、天冬氨酸組成的催化三聯(lián)體。有些絲氨酸蛋白酶類如凝血酶類蛋白酶，其中包括凝血酶、組織纖維蛋白溶酶原激活劑、血纖維蛋白溶酶，它們參與凝血的發(fā)生以及炎癥應(yīng)答反應(yīng)；也有些如胰蛋白酶類的絲氨酸蛋白酶類的參與消化的酶類，包括胰蛋白酶、彈性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶；還有一些表達(dá)在神經(jīng)系統(tǒng)中的絲氨酸蛋白酶類，這些酶類與神經(jīng)系統(tǒng)正常的維持或是介導(dǎo)病理情況的發(fā)生。

苯甲脒親和介質(zhì)

對(duì)氨基苯甲脒既是重要的化工原料、藥物中間體, 又是胰蛋白酶、尿激酶等酶的抑制劑, 它還可以作為親和色譜法中的配體和絲氨酸蛋白酶活性位置的探針，因而備受關(guān)注。月旭Benzamidine Tanrose 4FF是將對(duì)氨基苯甲脒偶聯(lián)到瓊脂糖凝膠上而制成的一種親和層析介質(zhì)，可以用來純化絲氨酸蛋白酶。

圖 1 月旭 Benzamidine Tanrose 4FF填料

Benzamidine Tanrose 4FF

技術(shù)參數(shù)

名稱	Benzamidine Tanrose 4FF
基質(zhì)	高度交聯(lián)的4%瓊脂糖
粒徑范圍	45-165μm
平均粒徑	90μm
配基	對(duì)氨基苯甲脒
結(jié)合載量	35mg（胰蛋白酶）/ml（介質(zhì)）
pH穩(wěn)定性	1-9（短期）2-8（長(zhǎng)期）
化學(xué)穩(wěn)定性	所有常用水溶液、8M尿素、6M鹽酸胍
流速	300cm/h
操作壓力	≤0.3mpa
貯存溶液	0.05M醋酸鹽緩沖液、20%乙醇，pH 4.0
貯存溫度	4-8℃

應(yīng)用實(shí)例

層析柱：PreCot Benzamidine 4FF（5mL預(yù)裝柱）。

樣品：胰糜蛋白酶混合物；

結(jié)合緩沖液：50mM PB，50mM NaCl pH7.0；

洗脫緩沖液：0.1M GIy pH 2.7（洗脫液收集管中預(yù)先加入200μl 1M Tris-HCl pH9.0）；

流速：0.7mL/min。

訂貨信息

產(chǎn)品名稱	貨號(hào)	規(guī)格
Benzamidine Tanrose 4FF	00081-11001	25mL
	00081-11002	100mL
	00081-11003	500mL
	00081-11004	1L

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絲氨酸蛋白酶 純化方案

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